Peptit nükleik asit (PNA), doğal DNA ve RNA'ya göre yüksek seçicilik, güçlü afinite ve stabilite gibi çeşitli avantajlara sahip yapay bir nükleik asit molekülüdür. Katı faz sentezi, aşağıdaki spesifik adımlarla PNA'nın sentezlenmesine yönelik ana yöntemlerden biridir:
Uygun koruma gruplarının seçilmesi: Koruma gruplarının esterlerini veya amidlerini oluşturmak için koruma gruplarının PNA öncüsü üzerindeki amino veya karboksil gruplarıyla reaksiyona sokulması.
Polimer reçineye bağlanma: Koruyucu bir grupla modifiye edilmiş PNA öncüsü, tipik olarak 20-30 amino asit kalıntısı karbon zinciri uzunluğuna sahip bir polimer reçine kullanılarak polimer reçineye bağlanır.
Sentez döngüsünün tekrarlanması: N-terminal koruma grubunun çıkarılması dahil; Bir sonraki amino asit birimini ekleyin; N terminal korumasını tekrar gerçekleştirin.
Korumanın Kaldırılması ve Ayırma: Sentezden sonra, PNA peptid zinciri, alkalin muamelesi veya asit hidrolizi yoluyla polimer reçinesinden ayrılır ve PNA ürününü elde etmek için tüm koruyucu gruplar çıkarılır.
Bu yöntem, birkaç yüz nükleotid uzunluğa kadar PNA moleküllerini verimli bir şekilde sentezleyebilir ve sentezlenen ürünler yüksek saflığa sahiptir, bu da onları büyük ölçekli üretim için uygun hale getirir.
Ancak pratik uygulamalarda, genel otomatik sentezleyiciler tarafından toplanan PNA'nın saflığı ideal değildir. HiPep Araştırma Enstitüsü, yüksek saflıkta PNA ürünleri sağlayabilen yeni bir sentetik yöntem geliştirmiştir. Bu yöntem, pahalı bileşen fiyatları, koruyucu grupların kolay sterik engellenmesi ve monomer saflığının hedef PNA'nın biyolojik aktivitesi üzerindeki önemli etkisi gibi geleneksel sentezdeki bazı sorunları çözer. Standart sentez aralığı 10-15 bazdır ve sentez için 16'dan fazla bazdan oluşan bu, tedarikçiyle ayrı temas gerektiren özel bir sipariştir
Ek olarak PNA sentezi, farklı araştırma ihtiyaçlarını karşılamak için floresans modifikasyonu, biyotin modifikasyonu, peptid modifikasyonu, glikosilasyon ve DNA modifikasyonu gibi farklı modifikasyon yöntemlerini de içerir. Bu nedenle, spesifik uygulamaya dayalı olarak uygun sentez yöntemlerinin ve tekniklerinin seçilmesi çok önemlidir. senaryolar ve gereksinimler.
