Biyolojik araştırma alanında, TET - 213 hücre hattı, özellikle sinirbilim ve onkoloji ile ilgili çalışmalarda çeşitli deneysel araştırmalar için önemli bir model olarak ortaya çıkmıştır. Tet - 213 hücrelerinin önde gelen bir tedarikçisi olarak, bu hücrelere verimli gen iletimi için uygun transfeksiyon reaktiflerini seçmenin önemini anlıyoruz. Bu blog yazısı, TET - 213 için uygun transfeksiyon reaktiflerini keşfetmeyi ve avantajları ve sınırlamaları hakkında bilgi vermeyi amaçlamaktadır.
TET'i Anlamak - 213 Hücreler
Tet - 213, nöron gibi hücrelere farklılaşma yeteneği nedeniyle araştırmada yaygın olarak kullanılan bir insan nöronal hücre hattıdır. Bu hücreler bir nöroblastom tümöründen türetilir ve nöronal progenitör hücrelerin birçok özelliğini korur. Eşsiz özellikleri, nöronal gelişimi, işlevini ve nörolojik hastalıkların patogenezini incelemek için onları değerli kılar. Eksojen genlerin TET - 213 hücrelerine transfekte edilmesi, araştırmacıların gen fonksiyonunu, düzenleyici mekanizmaları ve spesifik proteinlerin hücresel süreçler üzerindeki etkilerini anlamalarına yardımcı olabilir.
TET - 213 hücrelerde transfeksiyon için temel hususlar
Bir transfeksiyon reaktifi seçmeden önce çeşitli faktörlerin dikkate alınması gerekir. İlk olarak, transfeksiyon verimliliği çok önemlidir. Yüksek verimlilik transfeksiyonu, hücrelerin büyük bir kısmının eksojen DNA veya RNA'yı almasını sağlar ve hedef genin sağlam ekspresyonuna izin verir. İkincisi, transfeksiyondan sonra hücre canlılığı korunmalıdır. Bazı transfeksiyon reaktifleri hücreler için toksik olabilir, bu da hücre ölümüne veya anormal hücresel davranışa yol açabilir. Üçüncüsü, transfekte edilen nükleik asit tipi (DNA, RNA veya oligonükleotitler) ve boyutu, transfeksiyon reaktifi seçimini de etkileyebilir.
TET - 213 hücre için uygun transfeksiyon reaktifleri
Lipid bazlı transfeksiyon reaktifleri
Lipid bazlı transfeksiyon reaktifleri, en yaygın kullanılan transfeksiyon maddeleri türlerinden biridir. Nükleik asidi kapsülleyen ve hücre zarı ile sigorta eden lipozomlar oluşturarak çalışırlar ve nükleik asidin hücreye girmesine izin verirler. Lipofektamin 2000, TET - 213 hücrelerini transfekte etmek için yaygın olarak kullanılan iyi bilinen lipit bazlı bir transfeksiyon reaktifidir. Yüksek transfeksiyon verimliliği, nispeten düşük toksisite sunar ve hem DNA hem de RNA'yı transfekte etmek için uygundur.
Lipofektamin 2000 mekanizması, lipopleksler oluşturmak için negatif yüklü nükleik asit ile etkileşime giren pozitif yüklü lipozomların oluşumunu içerir. Bu lipopleksler daha sonra endositoz yoluyla hücreler tarafından içselleştirilir. Hücrenin içine girdikten sonra nükleik asit salınır ve gen ekspresyonu için çekirdeğe taşınabilir.
Başka bir lipit bazlı reaktif olan lipofektamin 3000, Tet - 213 hücrelerinin transfekte edilmesinde de iyi performans göstermiştir. Geliştirilmiş transfeksiyon verimliliği ve azalmış toksisite ile Lipofectamin 2000'in geliştirilmiş bir versiyonudur. Lipofektamin 3000, hücre zarı ile daha iyi etkileşime ve nükleik asitlerin daha verimli bir şekilde verilmesini sağlayan yeni bir formülasyon kullanır.
Polimer bazlı transfeksiyon reaktifleri
Polimer bazlı transfeksiyon reaktifleri, Tet - 213 hücrelerini transfekte etmek için başka bir seçenektir. Polietilenimin (PEI) yaygın olarak kullanılan bir polimer bazlı reaktiftir. PEI, nükleik asitleri küçük parçacıklara yoğunlaştırabilen ve hücreler tarafından alımlarını destekleyebilen katyonik bir polimerdir. Tet - 213 hücrelerinde, özellikle DNA transfeksiyonu için yüksek transfeksiyon verimliliği sağladığı bildirilmiştir. PEI'nin avantajı düşük maliyeti ve kullanım kolaylığıdır. Bununla birlikte, yüksek konsantrasyonlarda hücreler için toksik olabilir, bu nedenle transfeksiyon koşullarının dikkatli optimizasyonu gereklidir.
Jetpei, yüksek transfeksiyon verimliliğini korurken toksisiteyi en aza indirecek şekilde tasarlanmış ticari bir polimer bazlı transfeksiyon reaktifidir. Transfeksiyon verimliliği ve hücre canlılığı arasında iyi bir denge sağlayarak Tet - 213 hücrelerinin transfekte edilmesinde başarıyla kullanılmıştır.
Viral bazlı transfeksiyon vektörleri
Viral bazlı vektörler ayrıca TET - 213 hücrelerine gen iletimi için yaygın olarak kullanılır. Adenovirüs vektörleri, yüksek transfeksiyon verimlilikleri ve hem bölme hem de bölünmeyen hücreleri enfekte etme yetenekleri ile bilinir. Nispeten büyük miktarda ekzojen DNA taşıyabilir ve güçlü ve sürekli gen ekspresyonu sağlayabilirler. Bununla birlikte, adenovirüs vektörlerinin üretimi daha karmaşık ve zaman - viral olmayan transfeksiyon reaktiflerine kıyasla tüketicidir.
Lentivirüs vektörleri başka bir seçenektir. Eksojen DNA'yı konakçı hücre genomuna entegre edebilirler, bu da stabil gen ekspresyonuna neden olabilirler. Lentivirüs vektörleri, kararlı hücre hatları üretme gibi TET - 213 hücrelerinde uzun vadeli çalışmalar için uygundur. Bununla birlikte, potansiyel biyolojik olarak riskleri nedeniyle özel kullanım gerektirirler.
TET - 213 hücre için transfeksiyon reaktiflerinin karşılaştırılması
Farklı transfeksiyon reaktiflerini karşılaştırırken, performanslarını transfeksiyon verimliliği, hücre canlılığı, kullanım kolaylığı ve maliyet açısından dikkate almak önemlidir. Lipofektamin 2000 ve 3000 gibi lipit bazlı reaktifler kullanımı nispeten kolaydır ve kabul edilebilir hücre canlılığı ile yüksek transfeksiyon verimliliğine sahiptir. Hem kısa vadeli hem de uzun vadeli deneyler için uygundurlar. PEI ve Jetpei gibi polimer bazlı reaktifler maliyet etkilidir ve iyi transfeksiyon verimliliği elde edebilir, ancak toksisite optimizasyonu gereklidir. Viral bazlı vektörler yüksek verimli gen iletimi ve kararlı ifade sunar, ancak daha özel ekipman ve güvenlik önlemleri gerektirir.
Transfekte Tet - 213 hücrelerin uygulamaları
Başarılı bir şekilde transfekte edildikten sonra, çeşitli uygulamalarda TET - 213 hücre kullanılabilir. Örneğin, gen fonksiyon çalışmalarında, transfekte edilmiş hücreler, spesifik genlerin nöronal gelişim ve fonksiyondaki rolünü araştırmak için kullanılabilir. Araştırmacılar, belirli bir geni aşırı eksprese ederek veya devirerek, hücresel morfolojideki değişiklikleri, nörotransmitter salınımını ve sinyal iletim yollarını gözlemleyebilir.
İlaç keşfinde, transfekte edilmiş TET - 213 hücreleri, potansiyel terapötik ajanları tanımlamak için bir tarama modeli olarak kullanılabilir. Örneğin, nörolojik hastalıklarla ilişkili genler hücrelere transfekte edilebilir ve daha sonra hücreler, hastalık ile ilişkili fenotipler üzerindeki etkilerini değerlendirmek için farklı bileşiklerle tedavi edilebilir.
Ayrıca, floresan proteinleri kodlayan genlerle transfekte edilmiş Tet - 213 hücre, canlı hücre görüntüleme çalışmaları için kullanılabilir. Bu, araştırmacıların dinamik hücresel süreçleri gerçek zamanda gözlemlemelerini sağlar.
İlişkili deneyler için ilgili peptitler
Transfekte Tet - 213 hücrelerini içeren bazı deneylerde ilave peptitler kullanılabilir. Örneğin,Siklo (Radfk)-Madde P (9 - 11), VeBeta - amiloid (1 - 40), insanNöronal sinyal, peptit - reseptör etkileşimleri ve nörodejeneratif hastalıklar ile ilgili çalışmalarda kullanılabilir. Bu peptitler, nöronal fonksiyon ve hastalık gelişiminin altında yatan mekanizmaları daha da açıklamaya yardımcı olabilir.
Çözüm
Tet - 213 hücreleri için uygun transfeksiyon reaktifinin seçilmesi, başarılı gen iletimi ve müteakip deneysel çalışmalar için çok önemlidir. Lipid bazlı, polimer bazlı ve viral bazlı transfeksiyon reaktiflerinin her birinin kendi avantajları ve sınırlamaları vardır. Araştırmacılar, bir transfeksiyon reaktifi seçilirken, transfeksiyon verimliliği, hücre canlılığı ve transfekte edilen nükleik asit tipi gibi deneylerinin spesifik gereksinimlerini dikkatlice dikkate almalıdır.
TET - 213 hücrelerinin bir tedarikçisi olarak, yüksek kaliteli hücreler sağlamaya ve hücre kültürü ve transfeksiyonu için en iyi uygulamalar hakkında rehberlik sunmaya kararlıyız. Araştırmanız için TET - 213 hücre satın almakla ilgileniyorsanız veya transfeksiyon reaktifleri ve ilgili deneyler hakkında sorularınız varsa, lütfen daha fazla bilgi için bizimle iletişime geçmekten ve potansiyel işbirliği fırsatlarını tartışmaktan çekinmeyin.
Referanslar
- Sambrook, J. ve Russell, DW (2001). Moleküler klonlama: bir laboratuvar kılavuzu. Soğuk Spring Harbor Laboratuvar Yayınları.
- Chen, C. ve Okayama, H. (1987). Memeli hücrelerinin plazmid DNA ile yüksek verimli dönüşümü. Moleküler ve Hücresel Biyoloji, 7 (8), 2745 - 2752.
- Amara, F., Rehem, A. ve Galy, A. (2016). Mevcut transfeksiyon yöntemlerinin ve dağıtım sistemlerinin gözden geçirilmesi. Eczacılık ve Biyoallied Bilimler Dergisi, 8 (3), 181 - 187.