Selam! Tet - 213 hücrelerinin tedarikçisi olarak, Tet - 213 hücrelerinde aptamer taramasının nasıl gerçekleştirileceğini sizinle paylaşmaktan büyük heyecan duyuyorum. Aptamer taraması, belirli hedeflere yüksek afinite ve özgüllükle bağlanabilen bu özel kısa nükleik asit dizilerini, yani aptamerleri bulmamıza yardımcı olabilecek harika bir işlemdir. Tet - 213 hücreye gelince, yepyeni bir olasılıklar dünyası var!
Öncelikle Tet - 213 hücrelerinden biraz bahsedelim. Bu hücreler oldukça benzersizdir ve biyolojik araştırmalarda çeşitli uygulamalara sahiptir. Onlar hakkında daha fazla ayrıntıyı web sitemizde bulabilirsinizTet - 213.
Aptamer Taramasına Hazırlık
Gerçek tarama sürecine geçmeden önce işleri hazırlamamız gerekiyor. İlk adım Tet - 213 hücrelerini uygun şekilde kültürlemektir. Sağlıklı bir durumda olduklarından ve doğru kültür ortamında iyi büyüdüklerinden emin olmak istiyorsunuz. Genellikle bu hücrelerin gelişmesi için ihtiyaç duyduğu tüm besinleri sağlayan özel bir ortam kullanırız.
Daha sonra ilk aptamer kütüphanesini hazırlamamız gerekiyor. Bu kütüphane, farklı nükleik asit dizilerinden oluşan büyük bir havuz gibidir. Her biri benzersiz bir diziye sahip milyonlarca hatta milyarlarca farklı aptamer içerir. Tarama sürecimizi başlatmak için bu kütüphaneyi kullanacağız.
Tarama Süreci
Şimdi Tet - 213 hücreleri üzerindeki aptamer taramasının en ince ayrıntısına varalım. En yaygın yöntem, Ligandların Üstel Zenginleştirme Yoluyla Sistematik Evrimi (SELEX) olarak adlandırılır. Adım adım şu şekilde çalışır:
Adım 1: Kuluçka
Aptamer kütüphanesini alıp Tet - 213 hücreleriyle karıştırıyoruz. Belirli bir süre, genellikle birkaç saat kuluçkada kalmalarına izin veriyoruz. Bu süre zarfında kütüphanedeki aptamerler Tet - 213 hücrelerinin yüzeyine bağlanma şansına sahip olacak. Bazı aptamerler güçlü bir şekilde bağlanırken diğerleri hiç bağlanmayacaktır.
Adım 2: Ayırma
Kuluçka sonrasında hücrelere bağlı olan aptamerleri bağlı olmayanlardan ayırmamız gerekiyor. Bunu yapmanın birkaç yolu var. Yaygın bir yöntem santrifüj kullanmaktır. Karışımı yüksek hızda döndürüyoruz ve bağlı aptamerlere sahip hücreler tüpün dibinde bir topak oluşturacak, bağlanmamış aptamerler ise süpernatanda kalacak.
Adım 3: Elüsyon
Bağlı aptamerleri ayırdıktan sonra onları hücrelerden çıkarmamız gerekiyor. Buna elüsyon denir. Aptamerler ile hücreler arasındaki bağları kırmak için özel bir tampon kullanıyoruz. Elüsyondan sonra orijinal kütüphaneyle karşılaştırıldığında Tet - 213 hücrelerine daha yüksek afiniteye sahip olan aptamerlerden oluşan bir koleksiyona sahibiz.
Adım 4: Amplifikasyon
Elüsyondan sonra elde ettiğimiz aptamerlerin sayısı genellikle oldukça azdır. Dolayısıyla bunları güçlendirmemiz gerekiyor. Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) adı verilen bir teknik kullanıyoruz. PCR, DNA veya RNA için fotokopi makinesi gibidir. Aptamerlerin milyonlarca kopyasını kısa sürede üretebilmektedir.
Adım 5: Yineleme
Eleme süreci bir turdan sonra bitmiyor. Genellikle inkübasyon, ayırma, elüsyon ve amplifikasyon adımlarını birkaç kez tekrarlarız. Her tura seçim döngüsü denir. Her döngüde, Tet - 213 hücreleri için en yüksek afinite ve spesifikliğe sahip aptamerleri bulmaya daha da yaklaşıyoruz.
Seçilen Aptamerlerin Değerlendirilmesi
Birkaç seçim döngüsünden sonra iyi adaylar olduğunu düşündüğümüz bir grup aptamerimiz var. Ancak mükemmel olduklarını varsayamayız. Bunları değerlendirmemiz lazım.
Aptamerleri değerlendirmenin bir yolu bağlanma afinitelerini ölçmektir. Yüzey Plazmon Rezonansı (SPR) veya İzotermal Titrasyon Kalorimetresi (ITC) gibi teknikleri kullanabiliriz. Bu yöntemler bize aptamerlerin Tet - 213 hücrelerine ne kadar güçlü bağlandığını söyleyebilir.
Ayrıca aptamerlerin özelliklerini de kontrol etmemiz gerekiyor. Bunların yalnızca Tet - 213 hücrelerine bağlandığından ve diğer hücre türlerine bağlanmadığından emin olmak istiyoruz. Bunu aptamerleri farklı hücre dizilerine karşı test ederek yapabiliriz.
Tet - 213 Hücresinden Seçilen Aptamerlerin Uygulamaları
Tet - 213 hücrelerinden seçtiğimiz aptamerler geniş bir uygulama alanına sahip olabilir. Örneğin teşhis analizlerinde kullanılabilirler. Bu aptamerleri sensörlere veya diğer tespit cihazlarına takabiliyoruz. Tet - 213 hücreleri mevcut olduğunda aptamerler onlara bağlanacak ve sensör bağlanmayı tespit ederek bize bir sinyal verecek.
Ayrıca hedefe yönelik ilaç dağıtımında da kullanılabilirler. Aptamerlere ilaç bağlayabiliyoruz. Aptamerlerin Tet - 213 hücrelerine afinitesi yüksek olduğundan ilaçları doğrudan bu hücrelere taşıyarak tedavinin etkinliğini arttırır ve yan etkileri azaltır.
Diğer Hususlar
Aptamer taraması sürecinde aklımızda tutmamız gereken birkaç şey daha var. Örneğin Tet - 213 hücrelerinin kalitesi çok önemlidir. Hücrelerin sağlıklı olmaması veya kontamine olması tarama sonuçlarını etkileyebilir.
Ayrıca sıcaklık, pH ve tamponun bileşimi gibi tarama koşulları aptamerlerin hücrelere bağlanması üzerinde etkiye sahip olabilir. En iyi sonuçları elde etmek için bu koşulları optimize etmemiz gerekiyor.
İlgili Peptitler
Diğer ilgili peptidlerle ilgileniyorsanız, ayrıca şunları da sunuyoruz:Dynorphin A (1 - 13), Amid, DomuzVeFibronektin Tip III Bağlantı Segmenti (1 - 25). Bu peptitlerin biyolojik araştırmalarda kendine özgü özellikleri ve uygulamaları vardır.
Çözüm
Tet - 213 hücrelerinde aptamer taramasının yapılması heyecan verici ve ödüllendirici bir süreçtir. Bu hücrelere yönelik afinitesi ve özgüllüğü yüksek olan ve çeşitli uygulamalarda kullanılabilecek aptamerlerin keşfedilmesine yol açabilir. Tet - 213 hücrelerinin tedarikçisi olarak araştırmanızda size destek olmak için buradayız. Tet - 213 hücrelerini satın almakla ilgileniyorsanız veya aptamer taramasıyla ilgili sorularınız varsa bizimle iletişime geçmekten ve bir satın alma görüşmesi başlatmaktan çekinmeyin. Sizinle çalışmayı sabırsızlıkla bekliyoruz!
Referanslar
- Ellington, AD ve Szostak, JW (1990). Spesifik ligandlara bağlanan RNA moleküllerinin in vitro seçimi. Doğa, 346(6287), 818 - 822.
- Tuerk, C. ve Gold, L. (1990). Üstel zenginleştirme yoluyla ligandların sistematik evrimi: bakteriyofaj T4 DNA polimerazına RNA ligandları. Bilim, 249(4968), 505 - 510.
- Jayasena, SD (1999). Aptamerler: Teşhiste antikorlarla rekabet eden yeni ortaya çıkan bir molekül sınıfı. Klinik Kimya, 45(9), 1628 - 1650.