Hibridoma Füzyon ve Seçim Ortamı (HAT)

产品信息 Ürün açıklaması

产品名称

Ürün Adı

杂交瘤细胞融合筛选培养基(HAT)

Hibridoma Füzyonu ve Seçme Ortamı (HAT)

Kat.No

BRS-MED01

规格

Şartname

500 ml/paket

500 mL / şişe

产品组分

Bileşenler

DMEM 基础培养基:80%(体积比)

DMEM Temel Orta: %80 (h/h)

进口胎牛血清:10%(体积比)

İthal Fetal Sığır Serumu (FBS): %10 (h/h)

条件培养基:10%(体积比)

Şartlandırılmış Ortam: %10 (h/h)

Hacim:100 ₺/mL

Penisilin: 100 U/mL

Değer:100 ₺/mL

Streptomisin: 100 U/mL

次黄嘌呤(Hipoksantin):100uM

Hipoksantin: 100 µM

胸腺嘧啶核苷(Timidin):16uM

Timidin: 16 µM

Aminopterin:0.4uM

Aminopterin: 0,4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Diğer Katkı Maddeleri: Çeşitli sitokinler (yeterli miktarda) ve takviyeler

保存条件

Saklama koşulları

-20 derece, 18 derece.

-20 derecede saklayın. Raf ömrü: 18 ay.

使用方法

Kullanım Talimatları

培养基融化:

37 derece 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

Süre: 本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5 dk使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Ortamın Çözülmesi:

Ortamı 37 derecelik su banyosunda çözün. Dış yüzeyi %70 etanol ile silin ve kullanım için biyogüvenlik kabinine yerleştirin.
Not: Çözdürme sonrasında az miktarda beyaz topaklaşmış malzemenin ortaya çıkması normaldir. Flokların dibe çökmesi için besiyerinin 3-5 dakika beklemesine izin verin, ardından süpernatantı kullanım için dikkatlice toplayın.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4)细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置37 derece %5 CO2 培养箱静置培养.

Hücre Füzyonu ve Tohumlama:

Hücre füzyonunu fiziksel (elektrofüzyon) veya kimyasal (geleneksel PEG) yöntemleri kullanarak gerçekleştirin. Birleştirilmiş hücreleri doğrudan bu ortamda uygun yoğunluk ve hacimde yeniden süspanse edin:

Elektrofüzyon: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ hücre/kuyu

PEG füzyonu: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ hücre/kuyu
Önerilen hacim: 96 kuyucuklu bir plakada 200 μL/kuyu.
Kültür için 37 derecede, %5 CO₂'de inkübe edin.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Orta Değiştirme:

Füzyondan sonraki 4 ila 8. günlerde- hücrelerin büyüme durumuna göre kısmi veya tam ortam değişimi gerçekleştirin.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Klon Taraması:

Kuyucuklardaki hücre klonları uygun boyuta ulaştığında pozitif klon taraması gerçekleştirin.

注意事项

Önlemler

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Bu ürün toksiktir ve yalnızca hibridoma hücrelerinin seçimi ve kültürü için tasarlanmıştır. Canlı hayvan kültürü, teşhis amaçlı veya tedavi edici uygulamalar için kullanılmamalıdır.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0).

Bu ürün, HGPRT seçim sistemi kullanılarak hibridoma hücrelerinin seçimi ve kültürü için uygundur. TK veya diğer seçim sistemleri için geçerli değildir. Bu ortam, HGPRT-eksik hücrelerin (örn. NS1, SP2/0) doğrudan kültürü için kullanılamaz.

pH 7.2~7.4, pH 7.2~7.4, pH 7.2~7.4.

Bu ürün pH'ı 7,2-7,4 olan steril bir çözeltidir. Tüm işlemler aseptik koşullar altında gerçekleştirilmelidir.